ELISA样本制备和收集指南

ELISA样本制备和收集指南

1.液体类型样品

液体类实验样品含: 血清、血浆、尿液、胸腹水、细胞培养上清等。

【细胞培养上清】

将细胞培养基移至离心管，并在4℃条件下以1,500 rpm离心10分钟。立即等分上清液并于-80℃下保存样品。尽可能减少样品冻融。

【血清】

室温血液自然凝固10-20分钟后，在4℃条件下以3,000 rpm离心10分钟。立即等分上清液并于-80℃下保存样品。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。避免反复冻融样品。

【血浆】

将全血收集到含抗凝血剂的管中，根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，在4℃条件下以3,000 rpm离心10分钟。立即等分上清液(血浆)并于-80℃下保存样品。避免反复冻融样品。

【尿液】

用无菌管收集，并在 4℃下以10,000 x g离心2分钟。立即等分上清液并于-80℃下保存样品。避免反复冻融样品。

【唾液】

收集样品并在4℃下以10,000 x g离心2分钟。等分上清液并在-80℃下保存样品。避免反复冻融样品。

2.组织样品

采集组织(最好在冰上操作，并应尽可能快以防止被蛋白酶降解)样品后，称取组织净重，用液氮迅速冷冻保存备用。将样品保存在- 80℃下以便后续使用或放置在冰上进行直接匀浆。加入一定量的组织提取缓冲液，用手工或匀浆器将样品匀浆充分。在4℃下以13,000 rpm离心20分钟。置于冰上，将上清液(可溶的蛋白质提取物)等分至新的冷却管中并在-80℃下保存样品。避免反复冻融样品。

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