在细胞生物学、组织工程和再生医学研究中，将组织或细胞团块有效、温和地解离为单细胞悬液，是进行后续培养、分选、转染或测序等实验的关键第一步。传统胰蛋白酶虽应用广泛，但对某些敏感细胞（如干细胞、原代神经元、类器官）易造成损伤。为此，Sigma公司开发了多种特殊培养物解离试剂，针对不同细胞类型和实验需求提供精准解决方案。了解这些Sigma代理试剂的种类与特点，有助于科研人员优化实验流程、提高细胞活性与得率。 一、Accutase®：温和高效的通用型解离酶
Accutase®是Sigma受欢迎的非动物源性解离试剂之一，由蛋白水解酶和胶原酶活性成分复合而成。其主要优势在于作用温和、无需中和——解离完成后可直接离心去除，不会残留毒性。特别适用于贴壁性较强的细胞系（如HEK293、CHO）、人胚胎干细胞（hESCs）及诱导多能干细胞（iPSCs），能有效维持细胞表面标志物完整性和多能性。
二、Collagenase（胶原酶）系列：专攻结缔组织与实体瘤
胶原是细胞外基质（ECM）的主要成分，尤其在肝脏、胰腺、肿瘤等组织中含量丰富。Sigma提供多种纯度与特异性的胶原酶，如：
Collagenase Type I：含较高胰蛋白酶活性，适合上皮、肝、肾等软组织；
Collagenase Type IV：低胰酶活性，适用于胰岛细胞、乳腺组织等对蛋白酶敏感的样本；
Liberase™TL/TH Research Grade：高纯度、无动物源成分的重组胶原酶，批次稳定性佳，常用于临床前研究和GMP级细胞制备。
使用时通常需与中性蛋白酶（如Dispase）或透明质酸酶联用，以协同降解多种ECM成分。
三、TrypLE™：胰蛋白酶的理想替代品
TrypLE™是一种重组真菌来源的丝氨酸蛋白酶，功能类似胰蛋白酶，但不含动物源成分、pH稳定性更好、作用更温和。它能在室温下快速解离多种贴壁细胞，且对细胞膜受体损伤小，解离后细胞恢复快。广泛用于常规细胞传代及流式细胞术前处理。
四、StemPro®Accutase®与Gentle Cell Dissociation Reagent（GCDR）
针对干细胞和类器官，Sigma还推出更精细化的产品。例如Gentle Cell Dissociation Reagent是一种无酶、化学成分明确的解离液，通过螯合钙镁离子破坏细胞间连接，适用于形成紧密球状结构的神经球或肠类器官，能最大限度保留细胞完整性与功能。
五、选择建议与注意事项
选择解离试剂应综合考虑：
细胞类型（原代/传代、上皮/间充质）；
实验目的（是否需保持表面抗原？是否用于移植？）；
是否要求无动物源成分（xeno-free）；
解离时间与细胞存活率的平衡。
此外，所有解离过程应在37℃严格控时，避免过度消化；解离后建议用含血清或抑制剂的培养基及时终止反应（除Accutase等免中和试剂外）。
Sigma提供的多样化特殊解离试剂，为现代细胞研究提供了“量体裁衣”式的工具选择。从通用型Accutase到高纯度Liberase，从酶解到非酶解方案，科研人员可根据具体需求精准匹配，既提升实验效率，又保障细胞质量。在追求可重复性与高标准的今天，合理选用解离试剂，已成为高质量细胞实验不可少的一环。
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