分子生物试剂在生物科研试剂占比大接近51%,各类生物制品的研发及生产离不开对酶、抗原、抗体等共性的功能性蛋白进行定向改造与进化,功能性蛋白的下游应用领域非常广泛。
用于细胞生物学中的常见分子生物试剂类别如下:
1.蛋白酶抑制剂
广义上指与蛋白酶分子活性中心上的一些基团结合,使蛋白酶活力下降,甚至消失,但不使酶蛋白变性的物质。在生物学实验中,经常需要破碎细胞提取蛋白质,这一过程同时可释放出蛋白酶,这些蛋白酶需要迅速地被抑制以保持蛋白质不被降解。在蛋白质提取过程中,需要加入蛋白酶抑制剂以防止蛋白水解。常用的蛋白酶抑制剂包括PMSF、胃蛋白酶抑制剂、亮抑蛋白酶肽、胰蛋白酶抑制剂和蛋白酶抑制剂混合使用。各种蛋白酶对不同蛋白质的敏感性各不相同,因此在试验中需要调整各种蛋白酶的浓度。由于蛋白酶抑制剂在液体中的溶解度极低,尤其应注意在缓冲液中加入蛋白酶抑制剂时应充分混匀以减少蛋白酶抑制剂的沉淀。
2.激酶调节剂
激酶调节剂一般指蛋白激酶调节剂,蛋白激酶,即蛋白质磷酸化酶,是一类重要的催化蛋白质磷酸化反应的酶。在信号转导的过程中有两个作用:一是通过磷酸化调节蛋白质活性;二是通过蛋白质的逐级磷酸化,使信号逐级放大,从而引起细胞反应。蛋白激酶的种类比较多,大部分都是属于重要的信号传导分子,其中对生物学功能影响比较大的有蛋白激酶G、蛋白激酶C、蛋白激酶a、蛋白激酶b、MAPK等。
蛋白激酶活性异常是导致肿瘤发生、生长和转移的重要原因之一。因此以蛋白激酶作为抗癌靶点,研发新型抗肿瘤药物,已经成为药物研发领域中最重要的研究方向之一,蛋白激酶调节剂也成为颇具潜力的抗肿瘤候选药物。
3.细胞周期调节剂
细胞周期是细胞生命活动的基本过程,它控制着细胞从静止期转向生长增殖期。细胞周期进程的实现有赖于各级调控因子对细胞周期精确而严密的调控,细胞周期蛋白依赖激酶和细胞周期蛋白是整个细胞周期调控机制中的核心分子。
细胞周期调控异常与细胞癌变密切相关,90%以上的肿瘤,尤其是胶质瘤和软组织肉瘤中激酶都有过度表达。