分子生物试剂是细胞内活性分析所需的物质,通常在样品制备过程中使用,高质量的混合物可以有效地处理细胞成分,从而提高显微镜观察的可行性。分子生物学是生物科学的一个分支,涉及细胞各种系统中生物分子之间的生物学活性的分子基础,包括DNA,RNA,蛋白质及其生物合成之间的相互作用以及这些相互作用的调控。分子生物学过程使用的试剂也可以统称为为分子试剂。
有关一些核酸提取类分子生物试剂的配制说明:
1.10%十二烷基硫酸钠(SDS)溶液
配制量:100mL。
配制方法:在90mL无菌水中溶解10g电泳级SDS,加热至68助溶,加入几滴浓盐酸调节溶液的pH值至7.2,加水定容至1L,分装备用。
注意事项:
①SDS的微细晶粒易扩散,因此称量时要戴面罩,称量完毕后要清除残留在称量工作区和天平上的SDS,10%SDS溶液无须灭菌(高温条件下分解会产生CO等有毒气体);
②若有沉淀形成,可以适当水浴加热溶解后继续使用;
③区别于十二烷基磺酸钠;
④pH极易调过需小心。
2.1%DEPC(焦碳酸二乙酯)处理水
配制量:1L。
配制方法:加1mL DEPC于999ml水中,用磁力搅拌器在37条件下搅拌4h以上,静置过夜,在121条件下高温灭菌20min,以使残余的DEPC失活。
注意事项:
①DEPC具有强烈的致癌性,故操作时必须戴双层口罩,双层手套于通风厨中进行;
②此处配制的DEPC水用于RNA提取中70%乙醇的配制及RNA的溶解。