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ATCC细胞的培养液配制简介

发布时间: 2021-07-16  点击次数: 81次
   ATCC细胞的细胞培养液的主要成分是氨基酸、葡萄糖、无机盐、维生素和微量元素等。为了维持稳定的pH,培养液中一般有一个pH缓冲系统,同时常加入少量的酚红作为pH指示剂。另外培养液中一般需要加入一定量的血清。
  ATCC细胞培养液中的氨基酸除了13种细胞生长所必须的氨基酸外,往往加入一些非必需的氨基酸以促进细胞的生长。在必需的氨基酸中,L-谷氨酰胺在溶液中不稳定(在4℃培养溶液中半衰期为3个星期,37℃中为1个星期),需要在使用时加入。所有培养器皿均需清水冲洗2-3d,达两次ddH2O,每遍洗刷3-4次,加塞包装,置于烤箱中干燥消毒,于培养前1天进行。
  ATCC细胞培养液的配制明细:
  1.解剖液:以无机盐(去除Ca2+,Mg2+)加葡萄糖配制成PBS缓冲液,保持一定的渗透压和pH值。
  2.基础培养基(MEM):主要为多种氨基酸,加入葡萄糖,双蒸馏水溶解。
  3.接种培养液:用于胰酶消化后的细胞分散,做成细胞悬液,其成分为MEM含1%谷氨酰胺,另加入10%马血清,当天配制。
  4.维持培养液:接种后24h,全部换成此液,后每2周换一次,每次换1/2。其成分为MEM中含5%马血清,1%谷氨酰胺,及适量的支持性营养物质。

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