Gibco血清是细胞培养中重要的元素之一,今天我们为大家整理了一些血清使用在实验室里常会遇到的问题供参考:
1.血清保存的好方法是什么?
建议血清应保存在-5至-2O℃环境下。然而若存放于4℃时,请勿超过一个月。若一次无法用完一瓶,建议无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。
2.血清的解冻技巧是什么?
建议将血清从冷冻箱取出后,先置于2-8℃冰箱使之融解,然后在室温下使之全融。但必须注意融解过程中必须规则地摇晃均匀。血清解冻后若发现有絮状沉淀物有许多种原因,但普遍的原因是由于血清中脂蛋白的变性所造成,而血纤维蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解冻后,也会存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但这些絮状沉淀物并不影响血清本身的质量。
若欲去除这些絮状沉淀物,可将血清分装至无菌离心管内,以400g稍微离心,上清液即可接着加入培养基内一起过滤。不建议以过滤的方法去除这些絮状沉淀物,因为它可能会阻塞过滤膜。
3.为什么要热灭活血清?
加热可以灭活补体系统。激活的补体参与溶解细胞事件,刺激平滑肌收缩,细胞和血小板释放组胺,激活淋巴细胞和巨噬细胞。在免疫学研究,培养ES细胞,昆虫细胞和平滑肌细胞时,推荐使用热灭活血清。
实验显示,经过正确处理的热灭活血清,对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进,或*没有任何作用,甚至通常因为高温处理影响了血清的质量,而造成细胞生长速率的降低。而经过热处理的血清,沉淀物的形成会显著的增多,这些沉淀物在倒置显微镜下观察,像是“小黑点”,常会让研究者误以为是血清遭受污染,而把血清放在37℃环境中,又会使此沉淀物更增多,使研究者误认为是微生物的分裂扩增。
因此建议大家若非必须,可不需要做热处理这一步。如此一来不但节省您宝贵的时间,更确保血清的质量。