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Gibco血清的培养基配制及前处理说明

发布时间: 2021-09-11  点击次数: 6次
   培养某一类型细胞没有固定的培养条件,Gibco血清培养时该如何选对培养基呢?
  一、合成培养基的配制
  1.根据细胞目录中的说明,按下表选择合适品牌及货号的培养基干粉,用适量超纯水充分溶解。
  2.按要求添加碳酸氢钠、谷氨酸钠、HEPES等,充分搅拌使之溶解。
  3.调pH至7.2左右。
  4.加水至最终体积。
  5.在超净台中对溶液进行滤过除菌,分装入250 mL或500 mL玻璃瓶中,用翻帽塞塞紧瓶口。
  6.瓶口封好,4℃冰箱贮存。
  二、生长培养基的配制
  除无血清培养之外,各种合成培养基在使用前需加入一定量的血清和抗菌素。
  培养基分装成小瓶(100-200 mL)以便使用,翻帽塞塞紧瓶口。
  按如下比例配制:基本培养基占80%-90%,血清占10%-20%。按1%体积分数加入双抗贮存液(青霉素+链霉素),使青霉素和链霉素的终浓度分别为100 U/mL和100μ/mL。
  三、Gibco血清的处理
  市场上出售的血清一般做了灭菌处理,但在使用前还应做热灭活处理,即通过加热的方法破坏补体(近来也有观点认为热灭活处理是不必要的)。
  1.将血清加热至56℃并保持30 min,其间要不时轻轻晃动,使受热均匀,防止沉淀析出。
  2.处理后的血清贮存于4℃。
  3.血清在使用前最好进行筛选以掌握血清的质量。
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