抗体作为娇气的蛋白质,它的保存有很多需要注意的地方。如果保存得当,大多数抗体的活性均可保持数月甚至数年。
1.一般保存方法
收到抗体后需要进行如下步骤操作:
离心并分装:收到抗体后首先进行离心操作使附着在管壁和盖子上的抗体合并到管底,避免造成损失;离心后进行分装保存,建议分装量以一次抗体使用量为准(不低于10ul),抗体反复冻融会是蛋白变性,降低与目标蛋白的结合率,同时也可以尽可能的降低污染的产生;
抗体保存:抗体通常保存温度为-20℃,但由于抗体存在形式不同,储存条件会有区别,具体储存方式要以产品说明书为准。
2.偶联抗体的保存
偶联抗体包括:酶标抗体、荧光标记、生物素标记,带有标记物的抗体储存条件会有不同,但以上偶联抗体均要避光保存,光照会影响偶联抗体的活性,需要保存在深色瓶内,或者包裹上铝箔。荧光偶联抗体特别容易受到光淬灭的影响,因此在整个实验过程中均应避光操作。
3.储存液
甘油:甘油作为常规的抗冻保护剂,为减少冻融损失也会在抗体中添加甘油使抗体终浓度为50%。
4.抗体浓度
一般建议抗体保存浓度为≥1mg/mL,因为蛋白如果在较低浓度下进行保存易降解,所以将抗体稀释至工作液浓度在4°C下保存时,最好不要超过一天时间。