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如何提高噬菌体展示文库的库容?

发布时间: 2023-10-19  点击次数: 241次

 噬菌体展示技术将基因型和表型统一于同一噬菌体颗粒,相较于传统的抗体制备技术,提供了不经免疫制备抗体的可能,可以解决因为弱抗原、自身抗原、具有毒性的抗原等抗体制备的困难。因此也是目前抗体库制备中应用十分广泛的一项技术。

一个好的噬菌体抗体库需要具备较大的容量和良好的多样性,如果库容量较小,则难以获得高亲和力的抗体。那么想要获得较大库容和多样性丰富的噬菌体文库,有哪些可以优化的因素呢?
 

一、选择高转化效率的大肠杆菌(感受态细胞)

噬菌体文库的库容会受大肠杆菌转化效率的限制,选择高效率的电转感受态细胞,能有效的增加噬菌体文库的库容,另外也可以通过增加转化次数来累积库容。在噬菌体展示文库构建过程中,使用比较多的感受态细胞有TG1、XL1-Blue、SS320等。

在进行转化实验时,要想获得高的转化效率,质粒/连接产物的纯度、电转的条件、质粒/连接产物的加入量以及操作的规范性也是需要注意的地方。