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多层囊泡 (MLV) 的制备

发布时间: 2023-10-24  点击次数: 207次

 

以下是用于制备脂质体的冻干(冷冻干燥)脂质混合物的方案的简要概述:

  1. 将脂质溶解在氯仿中。

  2. 以适当的比例混合脂质。

  3. 使用干燥氮气流小心蒸发有机溶剂。

  4. 将脂质混合物重新悬浮在环己烷中。如果混合物未全部溶解在环己烷中,则添加少量乙醇(环己烷体积的 1-2%)。不要使用过多的乙醇,因为过量的乙醇不会使溶液冻结。

  5. 使用干冰冷冻环己烷溶液。

  6. 快速将冷冻混合物置于高真空系统(冻干系统)上。一般来说,“室内真空"系统对于这个过程来说不够强大。样品应保持冷冻状态直至全部干燥;如果样品开始解冻,则可能是真空不够强,或者存在太多乙醇。解冻的样品不会产生白色粉末,并且可能会从小瓶中隆起或起泡。

  7. 将样品放在真空系统上 3-5 小时(取决于使用的环己烷量)或直到样品全部干燥(从真空中取出时,小瓶摸起来或环己烷的气味不应感觉冷)。注意:这会产生干燥的白色粉末,很容易悬浮在水中。另一种方法是使用适当的水性缓冲液重新悬浮通过蒸发氯仿而产生的脂质膜。

  8. 将脂质混合物悬浮在水性缓冲液中(缓冲液温度应高于脂质的相变温度),并让混合物在脂质的相变温度以上水合 30-60 分钟(偶尔涡旋)。该过程产生大的多层囊泡(LMV 或 MLV)。对于要包埋的水溶性化合物,遵循相同的方案,不同之处在于将化合物溶解在用于重构干脂质的水性缓冲液中,并且通过凝胶过滤除去外部化合物(未封装的)。

参考

Frank Szoka, Jr. 和 Demetrios Papahadjopoulos,(1980),“脂质囊泡(脂质体)的比较特性和制备方法",Ann。生物物理学牧师。生物工程。,9:467-508。