用鼠尾胶原蛋白进行胶原收缩测定

ACOX3 功能障碍是颈内动脉复发性自发性血管痉挛的潜在原因

使用的先进 BioMatrix 产品：

RatCol® I 型鼠尾胶原蛋白 (4 mg/ml) 和中和溶液（包含在鼠尾胶原蛋白试剂盒中）

产品的使用方式：

我们的胶原蛋白用于形成 3D 水凝胶，并用 HASMC 播种/嵌入。作为胶原蛋白收缩测定的一部分，每 24 小时测量一次胶原蛋白水凝胶。

文章摘要：

颅外颈内动脉复发性自发性血管痉挛（RSV-eICA）是导致年轻人缺血性卒中的一个鲜为人知的原因。然而，其病理生理学仍然很大程度上未知。通过对受 RSV-eICA 影响的两个韩国异卵双胞胎兄弟的 ACOX3 基因进行全外显子组测序，我们鉴定了两种复合杂合错义变异 c.235 T >G (p.F79 V) 和 c.665G>A (p.G222E) ）。计算机分析表明，这两种变体均被归类为致病性。体外 ACOX3 酶测定表明 F79 V 和 G222E 突变体实际上没有酶活性。为了确定突变体对血管痉挛的影响，我们对人主动脉平滑肌细胞（HASMC）进行了胶原收缩测定。

Carbachol 是一种胆碱能激动剂，可诱导 HASMC 收缩。使用 siRNA 敲低 HASMC 中的 ACOX3，可显着抑制由卡巴胆碱引发的 HASMC 收缩。通过编码siRNA抗性野生型ACOX3的质粒转染，卡巴胆碱诱导的HASMC收缩得到恢复，但通过ACOX3 G222E转染或ACOX3 F79V和ACOX3 G222E共转染则不能恢复，表明两种ACOX3突变体抑制卡巴胆碱诱导的HASMC收缩。我们认为 ACOX3 功能障碍会引起基底主动脉肌源张力的长期丧失。结果，颈内动脉中间段的平滑肌（其中交感神经支配特别丰富）变得对拟交感神经刺激（例如剧烈运动）过敏，导致复发性血管痉挛。因此，ACOX3功能障碍可能是RSV-eICA的致病机制。我们第一次报道了 ACOX3 可能参与维持人动脉平滑肌的基础肌源张力。