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Affinity Biologicals的 抗体选择

发布时间: 2024-03-20  点击次数: 437次

 

出于价格和性能的原因,多克隆抗体通常是实验室应用的想到的试剂。Affinity Biologicals 提供广泛的止血相关蛋白抗体系列。尽管 ABI 确实提供一些鼠单克隆抗体,但大多数抗体都是在绵羊和山羊中饲养的多克隆抗体。由于多克隆抗体含有针对抗原上多个识别位点(表位)的抗体,因此抗原-抗体相互作用的表观亲和力和亲和力非常高。这导致更高的灵敏度,也意味着抗原在变性或蛋白水解加工后更有可能被识别。这些对于诸如 SDS-PAGE 等变性凝胶的免疫印迹以及固定细胞和组织的免疫组织化学等应用来说是重要的考虑因素。多克隆抗体非常适合用于需要高灵敏度的免疫测定,并且通常是免疫沉淀技术和活性中和测定的想到的试剂。在 ABI,我们使用固定在树脂上的多克隆抗体来特异性免疫消耗柠檬酸盐血浆中的目标蛋白,并从这些树脂中回收目标蛋白,并具有出色的活性恢复,取得了巨大成功。

大多数 Affinity Biologicals 抗体都有多种不同的形式,每种形式的精制程度各不相同。

  • 全IgG是基础水平产品,是指使用多个沉淀和透析步骤从抗血清(通常是绵羊或山羊)中纯化的IgG抗体。IgG 的纯度通常为 90%,以含有 50% 甘油 (v/v) 的 HEPES 缓冲盐水溶液形式提供。滴度基本上与起始抗血清相同,并且每个小瓶通常含有从一毫升抗血清中回收的 IgG 量。该级别的产品通常用于免疫沉淀、免疫电泳、免疫耗竭和活性中和测定等应用。

  • 亲和纯化的 IgG是使用固定化抗原进一步纯化的抗体。亲和纯化是一种富集过程,其中整个 IgG 通过共价连接有抗原的树脂。在破坏抗原-抗体相互作用的条件下,非反应性抗体被洗掉,特异性抗体被洗脱。结果是纯度非常高的产品,滴度比全 IgG 高得多。该级别的产品适用于免疫印迹、细胞免疫染色和多种类型的免疫测定等应用,这些应用需要通过这种富集产品实现更高的信噪比。

  • 抗体偶联物是完整的 IgG 或亲和纯化的 IgG,已与作为报告分子的辣根过氧化物酶、FITC 或生物素偶联。这些产品适用于免疫测定、免疫印迹或流式细胞术等应用。


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