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Chrono-log血小板试剂操作及结果判定解读

发布时间: 2022-09-22  点击次数: 9次
   Chrono-log血小板试剂在组成上包括一个微孔板;低离子强度溶液;阳性质控,包含血小板特异性抗体;阴性质控,不包含血小板特异性抗体;抗IgG:对人IgG有特异性的鼠单克隆抗体。本试剂用于进行血小板抗体检测。
  对于血小板的抗体筛检可将机采三人份新鲜O型血小板血浆混合均匀,用生理盐水调整血小板浓度为100-200*109个/L,将血小板加入反应板孔中央,每孔50µl(注意:移液器枪尖不要触碰反应板底部和周边)。
  具体操作流程如下:
  1.50g离心5min。用洗液洗涤反应板3次,每次静止放置半分钟,以除去未与反应板上包被的血小板单克隆抗体结合的血小板。
  2.向每个反应孔中加入2滴(100µl)低离子介质,并向相应的孔中分别加入1滴(50µl)待检患者血清(血浆)、阴性、阳性对照。
  3.37℃水浴孵育30min。用洗液洗涤反应板5次(方法同上)。
  4.立即加入1滴(50µl)抗人IgG试剂和1滴(50µl)指示细胞,振动混匀。
  5.200g离心5min。
  6.肉眼判读结果。将机采三人份新鲜O型血小板血浆混合均匀,用生理盐水调整血小板浓度为100-200*109个/L。同时将供者和受者富含血小板血浆3000rpm 5min离心,使血浆和血小板分离,移出上层血浆至另一试管中备用,用生理盐水将血小板调整至上述浓度。将血小板分别加入标记好的反应板孔中央,每孔50µl。
  7.50g离心5min。用洗液(蒸馏水30倍稀释)洗涤反应板3次,每次静止放置半分钟,以除去未与反应板上包被的血小板单克隆抗体结合的血小板。向每个反应孔中加入2滴(100µl)低离子介质,并向相应的孔中分别加入1滴(50µl)供受者血浆阴性、阳性对照。
  8.37℃水浴孵育30min。用洗液洗涤反应板5次(方法同上)。立即加入1滴(50µl)抗人IgG试剂和1滴(50µl)指示细胞,振动混匀。
  9.200g离心5min。肉眼判读结果。
  10.实验结果判定方法:
  ①阳性结果:指示细胞在反应板底部平铺,形成细胞层;
  ②阴性结果:指示细胞在反应板底部中央形成细胞聚集。
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