通过挤压制备大的单层囊泡 (LUVET)

通过冻干或蒸发制备干脂质混合物

将挤出机支架/加热块放在热板上。将温度计插入加热块中提供的孔中。打开热板，并使其达到所需的温度。让加热块的温度达到所需值（大约 15 分钟）。

使用合适的缓冲液水合脂质混合物 >30 分钟。在水合和挤出过程中，脂质悬浮液应保持在脂质的相变温度以上。为了提高水溶性化合物的截留效率，可以通过将样品瓶交替放置在干冰浴和温水浴中，使水合脂质悬浮液经历3-5次冷冻/解冻循环。

一旦样品全部水合，将样品装入其中一支气密注射器中，并小心地放入微型挤出机的一端。注意：为了减少死体积，请将装满缓冲液的注射器穿过挤出机来预润湿挤出机部件；丢弃缓冲区。新注射器可能有紧密的配合部件；为了便于挤出，在将柱塞插入针筒之前，用缓冲剂预先润湿注射器针筒和柱塞。

将空的气密注射器放入微型挤出机的另一端。确保空注射器柱塞设置为零；当脂质通过膜挤出时，注射器将自动填充。

在将组装好的挤出机设备放入加热块之前，检查加热块的温度。温度必须低于80℃，否则注射器会损坏。注意：挤出机装置在插入加热块之前必须全部组装，否则会损坏。

将全部组装好的挤出机设备插入挤出机支架。插入六角螺母，使任何两个相对的顶点落在垂直平面内。使用摇臂夹将注射器与加热块保持良好的热接触。注意：挤出机装置在插入加热块之前必须全部组装，否则会损坏。

让脂质悬浮液的温度与加热块的温度平衡（大约 5-10 分钟）。

轻轻推动已填充注射器的柱塞，直至脂质溶液全部转移到备用注射器中。

轻轻推动备用注射器的柱塞，将溶液转移回原来的注射器。

重复步骤 9 和 10 至少 4 次（总共 10 次穿过膜）。一般来说，通过膜的次数越多，脂质溶液变得越均匀。

最终的挤出物应填充备用注射器。这是为了减少被较大颗粒或异物污染的机会。

脂质悬浮液应开始澄清，产生稍微浑浊的透明溶液。雾度是由于悬浮液中残留的大颗粒引起的光散射造成的。

最终挤出后，从加热块上取下微型挤出机。

从挤出机中取出已填充的注射器，并将脂质溶液注入干净的样品瓶中。重要提示：取出注射器时，请将注射器直接从挤出机中拉出；以一定角度取出可能会导致注射器破裂。

实验期间将囊泡制剂储存在脂质的转变温度以上。不使用时，将囊泡溶液储存在 4°C 下。不要冻结。在 4°C 下储存时，囊泡溶液在水性介质中不能稳定超过 3-4 天。在较高温度和 pH 8 下储存囊泡溶液可能会缩短囊泡悬浮液的寿命。

在使用新的脂质制剂之前全部清洁仪器。