EDTA是怎样分离ATCC细胞的？

　　ATCC细胞是指由ATCC提供的已经经过鉴定和保种的细胞株，广泛应用于生物学、医学等领域的研究和实验中。在使用ATCC细胞进行实验时，通常需要将细胞从培养基中分离出来。由于细胞表面存在许多蛋白质和多糖等物质，这些物质会与培养基中的其他成分相互作用，导致细胞难以被分离出来。因此，需要使用一些特殊的方法来去除这些物质，以便更好地分离细胞。

　　EDTA可以通过与细胞表面的钙离子结合，形成稳定的络合物，从而使细胞表面的蛋白质和多糖等物质失去活性。具体来说，当EDTA与钙离子结合后，会形成一个五元环结构的螯合物，这个螯合物可以与细胞表面的蛋白质和多糖等物质结合，从而使其失去活性。这样就可以通过离心等方法将细胞从培养基中分离出来。

　　EDTA分离ATCC细胞的步骤：

　　1.将细胞培养在含有10%FBS的培养基中，直到它们达到80-90%的密度。

　　2.用PBS洗涤一次细胞，以去除残留的培养基和其他杂质。

　　3.向细胞中加入1-2毫升的0.25%胰蛋白酶-EDTA混合液(每毫升含0.25克胰蛋白酶和10毫克EDTA)，并在室温下孵育5-10分钟。

　　4.轻轻摇晃培养瓶使胰蛋白酶-EDTA混合液均匀分布到整个培养瓶中。

　　5.在显微镜下观察细胞是否已经从培养瓶壁上脱落下来。如果还有残留的细胞，可以再次加入少量的胰蛋白酶-EDTA混合液并继续孵育几分钟。

　　6.用移液器将消化后的细胞悬液转移到离心管中，并用PBS稀释至适当浓度。

　　7.在室温下离心5分钟，使细胞沉淀下来。然后用吸管将上清液吸出并将沉淀重新悬浮在适量的PBS中即可。