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ATCC细胞的初代培养实验说明

发布时间: 2021-07-13  点击次数: 7次
   对于ATCC细胞的初代培养或原代培养,是从供体获取组织后的第1次培养。其主要的优点是组织和细胞刚刚离体,生物性状尚未发生很大的变化,具有二倍体遗传性状,在供体来源充分、生物条件稳定的情况下(年龄、性别),在一定程度上能反映体内状态。
  ATCC细胞进行初代培养的实验步骤如下:
  1.剪切
  把组织小块(1cm³)置入小烧杯或青霉素小瓶中,用Hanks液漂液二三次以去掉表面血污,吸净Hanks液,用眼科剪反复剪切成1mm³块为止。
  2.摆布
  用弯头吸管吸取若干小块,置入培养瓶中;用吸管弯头把组织小块摆布在培养瓶底上,小块相互距离以0.5cm为宜,每一25ml培养瓶底可摆布20-30块。
  3.轻轻翻转培养瓶,令瓶底向上。注意翻瓶时勿令组织小块流动,塞好瓶塞,置36.5℃温箱2小时左右(勿超过4小时),使小块微干涸。
  4.培养
  取出培养瓶并开塞,保持46°斜持培养瓶(瓶底仍向上),向瓶底角部轻轻注入培养液小许,然后缓缓再把培养瓶翻转过来,让培养液慢慢覆盖附于瓶底上的ATCC细胞组织小块(组织小块附着尚不牢,注意不要把组织块冲走);置温箱中静止培养。待细胞从组织块游出数量增多后,再补加培养液。
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