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ATCC细胞关于无限细胞系一些应用限制解读

发布时间: 2022-08-24  点击次数: 395次
   ATCC细胞在收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本,储存在4℃备用,如有特殊原因需要周期收集标本,将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存,避免反复冻融。标本2-8℃可保存48小时,-20℃可保存1个月。-70℃可保存6个月。部分激素类标本需添加抑肽酶。
  科研常用细胞直接从组织上分离的原代细胞和购买的细胞系,通常将从组织上分离获得的一代到十代内的细胞统称为原代细胞,而大部分原代细胞会在此之后逐渐生长停滞并衰老死亡,极少量能继续存活至五十代以后的细胞遗传信息发生了改变,成为无限细胞系或连续细胞系,一般的无限细胞系只具有永生性的特点,还有一些细胞的接触抑制消失,可以多层生长,甚至在异体接种后还有致瘤性。
  无限细胞系由于其永生和快速分裂的特点一直是细胞水平研究时的热门选择,由于方便培养、种类繁多、生长速度快且成本较低,可以快速开展研究,使得各种无限细胞系被广泛应用。然无限细胞系“浑身是宝”,但在应用上还是有一些限制:
  1.细胞的生物学特性改变
  在研究过程中由于需要大量的样本,无限细胞系需要快速繁殖并扩大培养,而其在连续传代培养过程中会发生一定突变,无限制地连续传代可能导致细胞系的基因型和表型都发生改变,从而影响实验结果。
  2.细胞系交叉污染
  这里说的交叉污染是细胞系之间的交叉污染,就是做实验用的细胞系内可能混进了其他种类的细胞。这可能是由于建立细胞系时导致的,也有可能是一些不当操作如同期多种细胞共养、耗材重复使用等,或者是由于一些细胞培养相关产品导致的,可能很不经意的一个操作便导致了整个实验的失败。
  3.细胞应用
  很多细胞在体内体外培养中无法增殖,比如在使用神经元、骨骼肌细胞、心肌细胞、周细胞以及终末分化的肝细胞等进行实验时,每次都需要再次从新鲜的组织中分离原代细胞。