免疫细胞化学是一种利用特异性抗体体检测抗原, 并且可以在显微镜下观察细胞内抗原定位的方法。在IC中经常会使用荧光进行检测。
主要有两种方法:直接法、间接法。
直接法:是直接在第一抗体上附上荧光标记 进行检测(直接法)。
间接法:是荧光标记的第二抗体与第一抗体反应并进行检测。
使用直接法时,通过荧光染色可以更容易的进行多重染色。在这种情况下,我们需要找到荧光间不会相互干扰的组合。
直接法的优点: 1.特别是使用荧光标记的第一抗体 时,易于进行多重染色。
2.不会出现第二抗体引起的非特异性染色。
3.可以缩短操作时间。
间接法的优点:
如果使用的第一抗体来自相同的宿主,那么可以使用相同的标记第二抗体,且较为通用。
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