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ATCC细胞一旦解冻后要进行的程序说明

发布时间: 2024-03-21  点击次数: 233次
   ATCC细胞是实验室常用的细胞模型,被广泛用于生物医学研究。当从液氮或超低温冰箱中解冻这些细胞后,为了确保细胞活性和实验的准确性,研究人员需要执行一系列关键步骤:
  1.快速解冻:迅速将冻存管从冷冻环境中取出,并立即置于37℃水浴中,以最快速度解冻细胞。避免细胞在冰晶形成过程中受到损伤,防止因缓慢解冻导致的渗透压变化损害细胞膜。
  2.清洁消毒:在操作前确保工作台面、设备和手部都已经进行了全消毒,以避免交叉污染。使用70%乙醇对冻存管外壁进行消毒,并在无菌条件下转移细胞。
  3.离心去冻存液:解冻后立即将细胞转移到含有适量培养基的离心管中,通过轻柔离心使细胞沉淀,去除含有DMSO的冻存液,因为DMSO可能对细胞产生毒性影响。
  4.温和重悬:丢弃上清液后,加入预热的适当培养基,用移液器轻柔吹打或轻轻摇晃离心管,使细胞温和地悬浮在培养基中。
  5.接种细胞:将重悬的细胞接种到含有适量全培养基的细胞培养瓶或皿中,轻轻晃动容器使细胞均匀分布。
  6.环境适应:将细胞置于恒定温度的CO2培养箱中,允许细胞适应环境,静置数小时,待细胞贴壁后进行检查。
  7.次日检查:在接种后的24小时内观察细胞附着情况,评估存活率和生长状态。如果有必要,更换新鲜培养基以提供充足营养,同时移除死亡细胞和其他残留物。
  8.常规维护:根据细胞类型和推荐的条件,定期更换培养基,监测细胞生长,并进行必要的传代培养。
  9.记录与追踪:详细记录解冻日期、批次、存活率、培养条件等重要信息,以便未来跟踪实验过程和结果。
  10.避免污染:所有操作应在无菌条件下完成,避免细菌或真菌污染,这可能会影响实验结果。
  正确处理解冻后的ATCC细胞是实验成功的关键。保持细胞活力的同时,避免污染和误操作是保证数据可靠性和可重复性的重要前提。通过遵循上述步骤,研究人员可以确保其体外实验的有效性,为取得准确和有意义的实验结果打下坚实的基础。