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通过COA报告如何对血清进行质量判断

发布时间: 2023-07-07  点击次数: 436次

 

胎牛血清质量如何有多种方法去进行判断,一种是从产品生产商提供的COA报告中检查几个关键指标进行判断,二种是通过肉眼观察物理性状和实验测试其对细胞的生长的维持和促进效果,包括接种率、生长曲线、细胞特征的维持效果。

其中比较快速便捷的方法是读懂产品生产商提供的COA,今天我们先介绍如何通过COA报告对胎牛血清进行质量判断。

胎牛血清(fetal bovine serum)是一种取自牛胚胎的血清,常用于配置动物细胞的培养基。胎牛血清含有各种生长因子,且抗体含量少。

 

COA的作用

COA全称Certificate of Analysis,它是厂家按照一定的质量标准和规范来对产品进行的一系列的性能指标测试,说人话就是:质检报告

第一步,先看明白COA。

结合国家制定的标准《中国生物制品主要原辅料质控标准 2000年版》针对胎牛血清最基础的看明白4项关键指标。分别是:有害微生物、内毒素、总蛋白含量、血红蛋白含量

 

1、COA关键指标 : 有害微生物

根据《中国生物制品主要原辅料质控标准 2000年版》规定:牛血清制品应过滤除菌后制成,不能含有牛腹泻病毒,不能含有噬菌体、支原体、真菌污染。

首先,胎牛血清不能含有有害微生物,包括细菌、真菌、支原体、噬菌体和国家规定的特定病毒。

所以,任何批次的胎牛血清,其上述质检必须要做,而且结果必须为不能检出。其有害微生物的检测结果为阴性。

2、COA关键指标 : 内毒素

根据《中国生物制品主要原辅料质控标准 2000年版》规定:血清中细菌内毒素含量不应高于10 EU/ml

内毒素来源于革兰氏阴性菌的细胞壁成分,主要化学成为脂多糖LPS。当细菌死亡溶解时释放。内毒素容易刺激细胞产生免疫反应,有一定毒性作用。

2000年版的国内生物制品质控标准明确指引了血清内毒素含量的最高上限为10EU/ml,到了2005年的中国药典更是将此标准提高到<5EU/ml。

3、COA关键指标 : 总蛋白含量

根据《中国生物制品主要原辅料质控标准 2000年版》规定:血清中蛋白质含量应该在3.5%~5%(w/V)

这个指标的意义在于判断该批次胎牛血清的牛龄。

胎牛血清的采集对象是指在母牛体内5-8个月牛龄的胎牛,随着胎牛在母牛体内逐步发育成熟,它的血清中的蛋白质含量也会不断增高。

如果蛋白质含量太高,说明胎牛血清采集的时间可能较晚,甚至是小牛出生后再采集的。

如果太低呢?有可能在生产过程中人为稀释了血清。所以品质好的胎牛血清,其蛋白质含量不能太高、也不能太低。在标准范围内即可。

4、COA关键指标 : 血红蛋白


根据《中国生物制品主要原辅料质控标准 2000年版》规定:血清中血红蛋白含量不应高于 0.02% (w/v)

 

 

         国内质控标准对牛血清进行了描述定义:浅黄色、澄清、稍粘稠的液体,且无溶血、无异物。

不少同学反馈,不同批次的血清的颜色会有不同,有的偏黄、有的偏红。市场上甚至还流行过通过看颜色是否红润来判断血清质量高低的说法。

其实,胎牛血清颜色有的深有的浅,我认为都是正常现象。

因为胎牛尚未发育完善,因此其凝血功能不完善,所以采集血清时难以避免溶血。只要有溶血,就会出现血红蛋白溢出到血清中。

决定血清色泽的因素是血红蛋白和胆红素,前者含量高,则呈现偏红的颜色,后者高则呈现为金黄色。不能简单的以颜色深浅来判断其质量好坏。

需要注意的反而是COA中血红蛋白含量是否在标准范围内,因为血红蛋白超标,意味着血清采集过程出现了比较严重的溶血现象。从一定程度上反映了采集流程的不规范和不严谨。

 

通过COA,可以帮助我们分析、判断该批次血清是否存在质量隐患。通过观察连续批次的COA,可以判断该品牌的血清生产工艺、血清品质是否稳定。对其中关键指标例如内毒素、血红蛋白的分析,可以帮助我们找出日常实验遇到问题的原因。例如细胞状态好坏。